ICS 65.020.99 CCS B 04 TB 团 体 标 准 T/ NAIA 0237—2023 枸杞中氯酸盐和高氯酸盐的测定 液相色谱 -质谱/质谱法 Determination of chlorate and perchlorate in wolfberry Liquid chromatography-mass spectrometry 2023-11- 01发布 2023-11- 15实施 宁夏化学分析测试协会 发 布 全国团体标准信息平台 前 言 本文件按照 GB/T 1.1-2020 《标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则》 的规定编写。 本文件由宁夏化学分析测试协会提出并归口。 本文件起草单位：宁夏农产品质量标准与检测技术研究所、银川海关技术中心 、宁夏化 学分析测试协会。 本文件主要起草人：杨春霞、刘 霞、王芳焕、 马婧、何虎、杨静、开建荣、 牛艳、王晓 静、陈翔、 李延斌、王晓菁、 张小飞。 本文件为首次发布。 全国团体标准信息平台 全国团体标准信息平台 枸杞中氯酸盐和高氯酸盐的测定 液相色谱 -质谱/质谱法 1　范围 本文件规定了枸杞干果和枸杞鲜果中氯酸盐和高氯酸盐含量的 液相色谱 -质谱联用 测定 方法。 本文件适用于 枸杞干果和枸杞鲜果中氯酸盐和高氯酸盐含量的测定 。 2　规范性引用文件 下列文件 对于本文件的 应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件， 仅所注日期的版 本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改 单）适用于本 文件。 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 BJS 201706 食品中 氯酸盐和高 氯酸盐的测定 SN/T 4089 出口食品中高氯酸盐的测定 液相色谱 -质谱 /质谱法 3　术语和定义 本文件没有界定的术语和定义。 4　原理 试样采用热水 -甲醇分步提取，提取液经 C18和石墨化炭黑 (GCB) 分散固相萃取净化， 采用液相色谱 -质谱联用仪检测，保留时间和离子对定性，基质外标法定量。 5　试剂 除非另有规定外，所有 试剂均为分析纯，水符合 GB/T 6682中规定的一级水。 5.1　乙腈（ CH 3CN）：色谱纯。 5.2　甲醇（ CH 3OH）：色谱纯。 5.3　甲酸（ HCOOH）：色谱纯。 5.4　甲酸铵（ HCOONH 4）：液质联用级。 5.5　石墨化炭黑 (GCB)： 120-400 目。 5.6　C18: 40 μm,100gm 。 5.7　标准品：氯酸钠 (CAS登录号 CDAA-S-200074-SD ，纯度＞99 %)、 高氯酸钠 (CAS登 录号 CDAA-S-200052S ，纯度＞99 %)。 5.8　甲酸铵溶液 配制 全国团体标准信息平台 20 mmol/L甲酸铵溶液：称取 0.6306 g甲酸铵（ 5.4），用超纯水溶解 稀释至 500 mL， 混匀。 5.9　标准溶液的配制 5.9.1　混合标准中间液：分别准确量取 1000 mg/L的氯酸盐和高氯酸盐 标准储备液 0.25 mL，于25mL容量瓶中，用超纯水稀释至刻度，摇匀 ，制成 10.0 mg/L氯酸盐、高氯酸盐 混合标准中间液， 4℃保存。 5.9.2　 混合标准工作溶液：分别准确量取混合标准中间液 2.50 mL，用超纯水稀释至刻 度，摇匀，制成 1.0 mg/L的氯酸盐、高氯酸盐混合标准工作液， 4℃保存。 5.9.3　基质混合标准工作溶液：根据需要分取适量混合标准溶液，加入一定量的空白基质 溶液，混匀。基质混合标准工作溶液现用现配。 6　仪器和设备 6.1　液相色谱质谱 /质谱仪：配有电喷雾离子源 (ESI)。 6.2　涡旋振荡器 。 6.3　组织捣碎机 。 6.4　高速万能粉碎机： 10000 r/min。 6.5　离心机： 4000 r/min。 6.6　电子天平：感量分别为 0.0001 g和0.01 g。 6.7　恒温水浴振荡器 。 6.8　具塞离心管： 50 mL。 6.9　滤膜： 0.22μ m ，有机相 。 7　试样制备与保存 干、鲜枸杞样品于 - 18 ℃冷冻冰箱中保存。试验时将干、鲜枸杞样品取出，鲜样用高 速组织捣碎机打浆，干样用高速万能粉碎机 （可加少量的液氮） 粉碎 （30 g 样品粉碎时 间为 30 s ），分别置于样品瓶中， -18 ℃冷冻备用。 8　测定步骤 8.1　样品提取 枸杞干果：准确称取 2.50 g（精确至 0.01g）枸杞干果置于 50 mL具塞离心管中，准确 加入 7.0 mL超纯水，在 60 ℃水浴锅中振荡 30 min，冷却后再准确加入 13.0 mL甲醇，涡 旋5 min，4000 r/min常温离心 3 min。 枸杞鲜果：准确称取 5.00 g（精确至 0.01g）枸杞鲜果置于 50 mL具塞离心管中，准确 加入 7.0 mL超纯水，在 60 ℃水浴锅中振荡 30 min，冷却后再准确加入 13.0 mL甲醇，涡旋 5 min，4000 r/min常温离心 3 min。 8.2　净化 枸杞干果：取上清液 1 mL于 15 mL 离心管中 (提前称好 150 mg C18 和 40 mg GCB) 涡旋净化，离心 2 min，过 0.20 μm 滤膜，用液相色谱 -质谱 /质谱测定。 全国团体标准信息平台 枸杞鲜果：取上清液 1 mL 于 15 mL 离心管中 (提前称好 50 mg C18 和 20 mg GCB) 涡 旋净化，离心 2 min，过 0.22 μm 滤膜，用液相色谱 -质谱 /质谱测定。 8.3　测定 8.3.1液相色谱参考条件 （a）色谱柱： AcclaimTRINITYP1 复合离子交换柱（ 100 mm×2.1 mm，3 μm），或性 能相当者。 （b）流动相： A为乙腈， B为20 mmol/L甲酸铵溶液。梯度洗脱程序见 附录 A.1。 （c）流速： 0.4 mL/min。 （e）柱温： 35 ℃。 （f）进样量： 2 μL。 8.3.2质谱参考条件 （a）离子源：电喷雾离子源（ ESI源）。 （b）检测方式：采用多反应监测（ MRM）模式采集数据。 （c）扫描方式： 负离子模式 扫描。 （d）离子源温度： 500 ℃。 （e）雾化气压力 （GSI）：20psi。 （f）气帘气压力（CUR）：40psi。 （g）离子化电压 （IS）:-4500 V。 （h）质谱参数 见附录 A.2。 注： 8.3.2的质谱条件仅供参考，当采用不同质谱仪器时，仪器参数可能存在差异，测定前应将质 谱参数优化到最佳。 8.3.3标准工作曲线 分别准确量取 1.0 mg/L混合标准工作液 0μL、25 μL、50 μL、125 μL、200 μL、 500μL、700μL、1000μL，用空白基质溶液 稀释并定容至 1.0 mL。氯酸盐、高氯酸盐系列 基质标准溶液浓度依次为： 0.00 ng/mL、2.50 ng/mL、5.00 ng/mL、12.5 ng/mL、20.0 ng/mL、50.0 ng/mL、70.0 ng/mL、100 ng/mL。 将混合标准工作溶液按仪器参考条件进行测定。以混合标准工作溶液的浓度为横坐 标，以峰面积响应值为纵坐标绘制标准工作曲线。 8.3.4定性测定 在相同试验条件下测定试样和混合标准工作溶液，记录试样和混合标准工作液中氯酸 盐、高氯酸盐的色谱保留时间，以相对于最强离子丰度的百分比作为定性离子的相对离子 丰度。若试样中检出与混合标准工作液（ 5.9.3）中氯酸盐、高氯酸盐保留时间一致的色谱 全国团体标准信息平台 峰，且其定性离子与浓度相当的标准溶液中相应的定性离子的相对丰度相比，偏差不超过 表1规定的范围，则可以确定试样中检出相应的氯酸盐、高氯酸盐。 表1定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差 相对离子丰度（ %） >50 >20~50 >10~20 ≤10 允许的相对偏差（ %） ±20 ±25 ±30 ±50 8.3.5样品测定 若试样检出与混合标准工作液（ 5.9.3）一致的氯酸盐、高氯酸盐，根据标准工作曲线 按外标法计算得到其含量。 8.4　空白试验 除不加试样外，均按试样同法操作。 9　结果计算 结果按式（ 1）计算： …………………………….( 1) 式中： X—试样中各待测组分的含量，单位为微克每千克（ µg/kg)； c—从标准工作曲线中读出的供试品溶液中各待测组分的浓度，单位为纳克每毫升 （ng/mL）； V—试样溶液最终定容体积，单